KRE33 : un nouveau constituant du SSU processome eucaryote

Fernandez Diaz, Erlinda (2014). « KRE33 : un nouveau constituant du SSU processome eucaryote » Mémoire. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en biochimie.

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Résumé

Le SSU («small subunit») processome est une énorme ribonucléoprotéine d'environ 80S qui est nécessaire aux processus d'assemblage et maturation de la sous-unité 40S du ribosome eucaryote. Ces processus commencent dans le nucléole par la transcription d'un long ARN ribosomique précurseur (pré-ARNr) de 47S (35S chez la levure) par l'ARN polymérase I. Chez Saccharomyces cerevisiae ce pré-ARNr subit une série de modifications chimiques et de clivages pour générer l'ARNr 18S mature qui compose la petite sous-unité (40S), ainsi que les ARNr 5,8S et 25S de la grande sous-unité (60S) du ribosome. Kre33 est une protéine nucléolaire qui contient des motifs conservés acétyltransférase, ATPase et ARN hélicase, ainsi qu'une extension C-terminale unique aux eucaryotes qui contient des motifs «coiled-coil» et NLS. Cette protéine est essentielle à la viabilité cellulaire et nécessaire à la formation de la sous-unité 40S, mais son rôle spécifique dans la biogenèse des ribosomes n'a pas encore été élucidé. Nos objectifs de recherche sont de déterminer si Kre33 est une composante du SSU processome et si son extension C-terminale contient des éléments importants pour sa fonction. Pour cela nous avons analysé le profil de sédimentation de Kre33 dans des gradients de saccharose et nous avons étudié les interactions de cette protéine avec différents composants du SSU processome par co-immunoprécipitation. Nos résultats montrent que Kre33 interagit in vivo avec plusieurs protéines du SSU processome dans un complexe de 80S ainsi qu'avec le petit ARN nucléolaire U3 («U3 snoRNA»), ce qui indique qu'elle est une composante du SSU processome eucaryote. De plus, nous avons démontré par mutagénèse dirigée et par des expériences de complémentation que l'extension C-terminale de Kre33, et en particulier le motif NLS, sont importants pour la croissance de la levure. L'ensemble de ces résultats ouvrent la voie à des nouvelles expérimentations afin de mieux comprendre le rôle de cette enzyme dans la biogenèse des ribosomes et dans d'autres processus cellulaires chez les eucaryotes. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : nucléole, ribosome, SSU processome, levure, acétyltransférase, interaction protéine-protéine, U3 snoRNA.

Type:	Mémoire accepté
Informations complémentaires:	Le mémoire a été numérisé tel que transmis par l'auteur.
Directeur de thèse:	Dragon, François
Mots-clés ou Sujets:	Ribosomes, Nucléole, Interactions protéine-protéine, Saccharomyces cerevisiæ, Acétyltransférases, Protéine Kre33, SSU Processome, U3 snoRNA
Unité d'appartenance:	Faculté des sciences > Département de chimie Faculté des sciences > Département des sciences biologiques
Déposé par:	Service des bibliothèques
Date de dépôt:	22 sept. 2015 14:45
Dernière modification:	22 sept. 2015 14:45
Adresse URL :	http://archipel.uqam.ca/id/eprint/7181

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