New tools for studying CDX neural functions

Aguirre Martinez, Daniel (2016). « New tools for studying CDX neural functions » Mémoire. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en biochimie.

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Résumé

Le système nerveux est un composant fondamental chez les vertébrés qui implique un réseau complexe de gènes régulateurs (GRN). Sa mise en place commence avec l'induction du neuroectoderme par l'activité des signaux Wnt, FGF et BMP le long de l'axe antéro-postérieur nouvellement formé. Plusieurs signaux transcriptionnels et morphogéniques coopèrent pour induire l'invagination du neuroectoderme ventralement afin de former le tube neural et la crête neurale qui donneront naissance, respectivement, au système nerveux central et au système nerveux périphérique. Le neuroectoderme postérieur possède son unique lot de molécules de signalisation et toute perturbation dans les évènements précoce de son développement entraîne un groupe de maladies et malformations congénitales distinct. L'utilisation de modèles transgéniques murins est une façon idéale de comprendre les activités transcriptionnelles et morphogéniques dans cette région. Nous proposons deux modèles basés sur les facteurs de transcription de la famille Cdx – essentiels pour le développement postérieur de l'embryon, et des acteurs majeurs dans le développement de la crête neurale (Sanchez-Ferras et al., 2014; Sanchez-Ferras et al., 2012). Le premier serait un modèle pour l'anomalie qui pourrait être entraînée par la surexpression conditionnelle du gène Cdx1 et nous permettrait ainsi de mieux comprendre le rôle de ce gène dans les cancers dérivés des cellules de la crête neurale. A ce jour, un criblage par PCR nous a permis d'identifier des cellules souches positives pour l'intégration d'une cassette Cdx1 mais une confirmation par southern blot est nécessaire. Concernant la deuxième souris transgénique, elle représente un modèle unique pour étudier les évènements précoces dans le neuroectoderme postérieur. En effet, elle est basée sur l'utilisation de l'enhancer (NSE) de Cdx2 qui permet de générer une lignée transgénique avec une induction spécifique au tube neural via la technique Cre-LoxP. Cependant, Cdx2NSE s'est révélée n'être que partiellement active dans le mésoderme. Cette activité mésodermale étant mineure, il serait possible de retirer les éléments non-neuraux de NSE afin d'obtenir une activité entièrement neurale. Pour déterminer la nature de l'activité des différents éléments de NSE, des essais luciférase ont été effectués par co-transfection du facteur pro-neural Sox2 et d'une protéine de fusion Lef1-βcaténine agissant comme effecteur de la voie Wnt, ces deux derniers étant importants pour le maintien de l'identité neuroectodermale postérieure. Les résultats ont montré que NSE est régulé par Wnt et Sox2 de manière synergistique, mais les éléments non-neuraux restent à identifier. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : GRN, neuroectoderme, postérieur, développement, Cdx, régulation, outils

Type: Mémoire accepté
Informations complémentaires: Le mémoire a été numérisé tel que transmis par l'auteur.
Directeur de thèse: Pilon, Nicolas
Mots-clés ou Sujets: Gènes CDX / Réseaux de régulation génique / Neuroectoderme / Neurologie du développement / Maladies -- Modèles animaux
Unité d'appartenance: Faculté des sciences > Département de chimie
Faculté des sciences > Département des sciences biologiques
Déposé par: Service des bibliothèques
Date de dépôt: 22 juin 2016 15:30
Dernière modification: 22 juin 2016 15:30
Adresse URL : http://www.archipel.uqam.ca/id/eprint/8648

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